Alteração do proteoma de P. putida em resposta a stress causado por fenol Avançado
Publicado em 18/11/2005
Comparação do proteoma de P. putida durante a adaptação e crescimento sob stress causado pelo fenol
O recurso à análise proteómica quantitativa permitiu identificar
aspectos da resposta global ao stresse causado pelo fenol na estirpe
modelo Pseudomonas putida KT2440, que tem a
sequência do genoma completamente determinada
,
o que tornou praticável a identificação, de uma forma relativamente
expedita, de cerca de duas centenas de proteínas, separadas nos géis 2-D.
Quando se adicionou fenol a uma cultura dessa estirpe bacteriana em fase de crescimento exponencial verificou-se uma inibição do crescimento (para 600 mg/l de fenol) ou a paragem do crescimento, embora sem redução da viabilidade celular (para 800 mg/l de fenol) (ver figura). As amostras celulares recolhidas para comparação do proteoma corresponderam a três condições fisiológicas diferentes: i) células controlo (a dividirem exponencialmente na ausência de fenol) e células expostas durante 1 hora a duas concentrações de fenol: ii) 600 mg/l ou iii) 800 mg/l.
Numa primeira fase, foi construído um mapa de referência do proteoma de P. putida
KT2440 (ver figura abaixo), cultivada no meio de crescimento base sem
suplementação com fenol, através da identificação, por espectrometria
de massa, de 195 proteínas separadas nos géis 2-D (material suplementar em Santos et al., 2004. Este número corresponde a cerca de 20% do total das proteínas detectadas em cada gel.
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