Observação microscópica de bactérias - coloração de Gram Básico
Publicado em 18/11/2005 (revisto em 04/04/2007)
Coloração de Gram de células de B. subtilis e de E. coli
Procedimento experimental
- Preparar suspensões de células de E. coli e de B. subtilis
em água destilada: transferir, com uma ansa esterilizada na chama do
bico de Bunsen, uma porção de cada uma das culturas fornecidas,
para tubos Eppendorf contendo 0.5 mL de água
destilada. Agitar no vórtex;
Passo 1
- Preparar um esfregaço de cada uma das culturas, espalhando uma gota de cada uma das
suspensões celulares preparadas acima sobre uma lâmina de vidro
desengordurada, recorrendo a uma ansa esterilizada. Secar ao ar;
Passo 2
- Fixar cada esfregaço pelo calor, passando rapidamente a lâmina
contendo o esfregaço sobre a chama do bico de Bunsen. Repetir este
procedimento mais duas vezes;
Passo 3
- Corar a preparação pelo método de Gram;
- Observar no microscópio óptico de campo claro com objectiva de imersão (x 100), não esquecendo colocar uma gota de óleo de imersão entre a
preparação e a objectiva.
Passo 5
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