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Electroforese

Nota:

Polissacárido extraído de algas marinhas. A concentração de agarose num gel varia normalmente entre 0,5 e 2%. Quanto maior a concentração de agarose, menor é a dimensão dos poros da malha do gel. Os géis de agarose são mais facilmente manipulados e não são tóxicos.

Nota:

Polímero com ligações cruzadas de acrilamida. O tamanho das cadeias do polímero é ditado pela concentração de acrilamida usada, normalmente entre 3,5 e 20%. É necessário um maior cuidado na preparação de géis de poliacrilamida. Estes têm de ser preparados entre placas de vidro pois o oxigénio inibe o processo de polimerização. Os géis de poliacrilamida são considerados não tóxicos, no entanto, a acrilamida como potente neurotóxico que é, deve ser manipulada com cuidado!

Nota:

Em condições adequadas, chegam a possibilitar a separação de fragmentos de DNA que diferem em apenas um par de bases.

A electroforese ou separação electroforética assenta na migração de moléculas carregadas por aplicação de um campo eléctrico.

Este processo é frequentemente usado para separar e algumas vezes purificar macromoléculas, especialmente proteínas e ácidos nucleicos, com base no seu tamanho, carga ou conformação. Como tal, a electroforese é uma das técnicas mais utilizadas em bioquímica e biologia molecular.

A separação electroforética de ácidos nucleicos e proteínas é realizada normalmente em géis de agarose ou poliacrilamida. Apesar dos géis de poliacrilamida permitirem uma maior resolução, são os géis de agarose, não tóxicos, os escolhidos para a separação de ácidos nucleicos. Os géis de poliacrilamida, com maior resolução mas com menor gama de separação que os géis de agarose, são normalmente usados na separação e caracterização de misturas de proteínas.

Sub-Temas e Tópicos

• • Electroforese de ácidos nucleicos - fundamentos

    Grupo de Ciências Biológicas do IST | 01/12/2005 | Intermédio

  • Electroforese e imunodetecção de proteínas

    Grupo de Ciências Biológicas do IST | 18/11/2005 | Básico