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Electroforese bidimensional (2-D) e a análise de proteomas

Em electroforese 2-D, as proteínas são separadas com base em duas das suas propriedades: numa primeira dimensão, de acordo com o seu ponto isoeléctrico (pI) e, numa segun­da dimensão, em gel de SDS-PAGE, de acordo com o seu peso molecular (MW). Ou seja, a electroforese 2-D resulta da combinação de duas técnicas: a focagem isoeléctrica (IEF), seguida de uma separação por SDS-PAGE.

Quando bem sucedida, obtém-se um gel de poliacrilamida conten­do numerosas manchas (spots) bem separadas, cada uma correspon­dendo a uma proteína (ou a uma forma proteica), como ilustrado na figura.

Exemplo do resultado final de uma electroforese 2-D. Exemplifica-se a  separação das proteínas de um extracto proteico de células de Pseudomonas putida KT2440 em gel de poliacrilamida (saber mais)

Sub-Temas e Tópicos

• • Preparação e quantificação de extractos proteicos

    Grupo de Ciências Biológicas do IST | 18/11/2005 | Intermédio

  • Focagem isoeléctrica (1ª dimensão)

    Grupo de Ciências Biológicas do IST | 18/11/2005 | Intermédio

  • Separação por SDS-PAGE (2ª dimensão)

    Grupo de Ciências Biológicas do IST | 18/11/2005 | Intermédio

  • Detecção de proteínas, digitalização dos géis e análise dos proteomas

    Grupo de Ciências Biológicas do IST | 18/11/2005 | Intermédio